实验背景:链霉菌与蛋白质提取的挑战
链霉菌(Streptomyces)是一类重要的工业微生物,广泛用于抗生素(如链霉素)、酶制剂及生物活性物质的合成。其菌丝体结构致密、细胞壁厚(革兰氏阳性菌),导致胞内蛋白质的提取效率低,传统破碎方法面临以下痛点:
超声波破碎:小规模处理效率低,易产热导致蛋白变性;
酶解法:成本高、耗时长,且可能引入杂质;
珠磨法:设备损耗大,操作复杂,难以放大生产。
净信高压均质机凭借高压剪切力与空穴效应,可快速破碎链霉菌细胞壁,释放胞内蛋白,成为蛋白提取的优选方案!
高压均质的原理:
高压泵头组件工作时将物料经过单向阀吸入泵腔,流体物料在柱塞的作用力下,泵腔和均质阀座之间的物料会行成高压。
高压物料通过均质阀组件时,产生以下三种均质效应:
① 剪切作用,均质阀座与阀芯间的缝隙很小,对物料颗粒产生剪切
②空穴效应,高速挤出的物料瞬间失压,达到使物料均匀分布目的
③ 碰撞作用,高速挤出的物料以高速度撞击到碰撞环上,产生撞击粉碎
实验步骤
1、 连接管路,打开主机及冷水机。
2、 排除液封液体、加入纯水清洗管道
3、 加入样品,等出料口出液后,进行步进式加压至1000 bar 均质3次。
4、 完成样品均质,出料口接料。
5、 加入纯水清洗,并泄压,直至纯水清澈,加入无水乙醇,等待出料口出样,停止主机。